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胶体金标记蛋白的纯化:（2）凝胶过滤法：此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋，在硅胶中脱水浓缩至原体积的1／5～1／10，广东胶体金免疫层析读数仪代理商，广东胶体金免疫层析读数仪代理商.再经1500r/min离心20min.取上清加至SephacrylS-400（丙烯葡聚糖凝胶S-400）层析柱分别纯化。层析柱为0.8cm×20cm，加样量为床体积的1／10，以0.02Mol/LPBS液洗脱（内含0，广东胶体金免疫层析读数仪代理商.1％BSA，0.05％NaN3，pH8.2者用IgG标记物），流速为8ml/h.按红色深浅分管收集洗脱液。一般先滤出的液体为微黄色，有时略混浊，内含大颗粒聚合物等杂质。继之为纯化的胶体金蛋白结合物，随浓度的增加而红色逐渐加深，清亮透明，然后洗脱出略带黄色的为标记的蛋白组分。将纯化的胶体金蛋白结合物过滤除菌、分装，4℃保存。可得到70％～80％的产量。胶体金免疫层析(GICA)技术是20世纪90年代初在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。广东胶体金免疫层析读数仪代理商
HCG金标免疫试验：金标免疫试验的原理将氯金酸(HAuCl4)用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒(胶体金)标记抗体，(或金黄色葡萄球菌A蛋白SPA)。金标为一种催化剂，经还原剂(如对苯二酸)处理，将显影剂中的银离子还原成不溶性金属银，沉淀在每个金颗粒的周围，银沉淀在光镜下可清楚地显示。滴金免疫实验原理同一般免疫斑点实验，也是用已知抗原或抗体包被硝酸纤维素膜，再用金标记抗体或抗原进行快速测定。临床应用的有两种方法：金标一步法(层析法)和金标二步法(斑点渗漏法)。广东胶体金免疫层析读数仪代理商胶体金标记 吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。
胶体金溶液是指分散相粒子直径在l—150 nm之间的金溶胶，属于多相不均匀体系，颜色呈桔红色到紫红色．胶体金作为标记物用于免疫组织化学始于1971年,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合.1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体（马抗人IgG）上，建立了间接免疫胶体金染色法。1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用。胶体金在免疫化学中的这种应用，又被称为免疫金．之后，许多学者进一步证实胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显改变．它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肤、抗原、核酸等生物大分子的精确定位,也可以用于日常的免疫诊断，进行免疫组织化学定位，因而在临床诊断及药物检测等方面的应用已受到重视．目前电镜水平的免疫金染色(IGS)，光镜水平的免疫金银染色(IGSS)，以及肉眼水平的斑点免疫金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力工具．
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点：*方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定性好，不需冷藏。*相比而言，其生产成本和检测成本均较低。*检测标本种类多：可用于查血、尿液或粪便，因而适合各种检查支持多联卡，支持单C多T混合的多联卡。
胶体金标记蛋白质影响因素：胶体金与蛋白质之间是通过正负电荷之间存在的范徳瓦尔引力相结合的，胶体金颗粒与蛋白质分子之间无共价键联系。胶体金标记蛋白质过程属于物理过程，标记体系的pH值、离子浓度及二者的比例等均可影响标记效果，一般情况下，当胶体金pH值接近或大于蛋白质等电点时，胶体金对蛋白质的吸附力强。反之，当胶体金pH值低于蛋白质等电点时，则会凝集而失去结合能力。如在标记葡萄球菌A蛋白（SPA）时，SPA等电点是pI5.1，胶体金的pH值可选择在pH5.9-6.2。标记单抗时，胶体金的pH值适宜在pH8.2。对于含有多种大分子蛋白的样品，如多价抗体的标记，实际上很难满足体系中各种蛋白分子的等电点的要求。为了取得较好的标记条件，可先将标记蛋白用低于pH9.0的缓冲液透析，胶体金的pH值调在pH9.0进行标记。影响胶体金标记蛋白质是否成功的另一个重要因素是胶体金与标记蛋白质的用量比例。通常蛋白质的用量取决于胶体金的颗粒大小，金颗粒直径越小，金颗粒所具有的总表面积就越大，可吸附蛋白质的量也就越大。疫金标记技术(Immunogold labelling technique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性。云南自动化读数仪市场价
测量原理：反射光谱测试。广东胶体金免疫层析读数仪代理商
Vakirs等于1985年建立了金标免疫滲滤技术，该技术原理是：先用胶体金标记二抗，随后将抗原物质包被于醋酸纤维素或硝酸纤维束膜，后采用特定形状的塑料卡盒及吸水滤纸等组装垂直渗滤装置。反应过程是；先将检测样品（血清）加在反应膜上，若样品中存在被检特异性抗体，则检测样品快速渗滤通过反应膜时，样品中的特异性抗体就会与包被于反应膜上的抗原结合，随后用缓冲液渗滤洗去样品中剩余的物质，再将金标二抗加于反应膜表面，当金标二抗在反应膜的渗滤过程中，金标二抗就会与结合于反应膜上的特异性抗体结合，再用缓冲液渗滤洗去未结合的金标二抗。此时，反应膜上会显示出红色的点。若样品中没有被检特异性抗体，则抗原抗体连锁反应不成立，金标二抗不会留在反应膜，也就不会出现红色的点。由于金标免疫渗滤技术操作简单，反应速度快，2-3分钟出现结果，特异性强，敏感性高，此项技术自诞生之日期，备受业界高度关注。Spielberg等于1989年建立了人类免疫缺陷病毒抗体检测金标免疫渗滤检测技术。金标免疫渗滤技术现已应用于医学临床检验，疫病预防、动物疫病防控，食品安全检测及农业病虫害检测等领域。金标渗滤法的缺陷是金标抗体有效期短，一般为6个月。 广东胶体金免疫层析读数仪代理商
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