胶体金的制备1、胶体金制备的注意事项(1)玻璃容器的清洁:玻璃容器应保持清洁,用前酸洗、硅化。(2)试剂、水质:实验用水一般用双蒸水。缓冲液有足够大的缓冲容量,浓度不应过高以免金溶胶自凝。2,新疆自动化读数仪市场价、常用方法一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、白磷。(1)柠檬酸三钠还原法:取0.01%氯金酸水溶液100ml加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠水溶液0.7ml,金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色,继续煮沸15分钟,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,如此制备的金溶胶其可见光区*高吸收峰在535nm,新疆自动化读数仪市场价,A1cm/535nm=1.12。2)柠檬酸三钠-鞣酸混合还原剂:改变鞣酸的加入量,新疆自动化读数仪市场价,制得不同大小的胶体颗粒。(3)白磷还原法:制备的胶体金直径约6nm,并有很好的均匀度,但白磷和yimi均易燃易爆,一般实验室不宜采用。疫金标记技术(Immunogold labelling technique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性。新疆自动化读数仪市场价
免疫胶体金技术的基本原理:胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。 胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金多次应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。福建多通道胶体金读数仪在线议价支持多通道(可根据客户卡的大小定制,目前至多可以支持12通道)同时检测。
溶胶的聚沉现象胶粒之间存在吸引力与排斥力这对矛盾,在溶胶胶粒带电及溶剂化的情况下,排斥力成为矛盾的主要方面,溶胶稳定而不聚沉。因为某种原因使溶胶粒带电量减到很小,甚至中和其所带电荷并能去溶剂化膜,胶粒之间可在更近的距离互相接近,引力成为主要矛盾,引力超过斥力时胶粒便聚结发生聚沉。引起溶胶聚沉的原因有。(1)少量电解质对溶胶的聚沉作用少量电解质即可使溶胶聚沉,但各种电解质的聚沉能力可用聚沉值来表示。聚沉值是在一定时间内使1L某浓度的溶胶产生聚沉所需电解质的zui小物质的量(mm01)。显然,聚沉值愈小,聚沉能力愈大。聚沉值从实验中得出如下的规则:①电解质负离子对带正电的溶胶起主要聚沉作用,正离子对带负电的溶胶起主要聚沉作用;②同价离子聚沉能力几乎相等,不同价离子的聚沉能力随离子价增加而明显增加。电解质能使溶胶聚沉是由于电解质与胶粒带相反电荷离子的作用,中和了胶粒所带的一部分电荷,使胶粒电量减少,扩散层缩小,溶剂化层变薄,而当双电子层厚度缩至很小和溶剂化层变得很薄时,两个质粒间便可以更加接近,即不产生斥力,两个胶粒间因引力加大而合并的趋势增强,甚至引力占优势以致使胶粒聚结而发生聚沉。
继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)之后,一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique, ICG)逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物,利用抗原抗体特异性反应,对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来,该技术因其操作简便、观察直观、灵敏度高、价格低廉等优点在医学、动植物检疫以及食品安全监督等各领域均得到了多方面的应用。胶体金即金的水溶液,是指分散相粒子直径在1-100 nm的金溶胶。由氯化金溶液在还原剂作用下,金离子还原成金原子,从而凝合形成特定大小的金颗粒,因其中正负离子组成胶粒的双电子层结构,从而使溶胶处于稳定状态,故称胶体金。 功能丰富,支持 急诊插入检测。
常用的免疫胶体金检测技术: (1)免疫胶体金光镜染色法 细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。 (2)免疫胶体金电镜染色法 可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。可用于病毒形态的观察和病毒检测。 斑点免疫金渗滤法 (3)应用微孔滤膜(如膜)作载体,先将抗原或抗体点于膜上,封闭后加待检样本,洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。 (4)胶体金免疫层析法 将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,当移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条,使用十分方便。可应用于海关检验检疫、环境监测、食品安全、临床诊断、药物筛选、重大疾病诊断检测等。内蒙古自动化读数仪在线议价
在反射率范围为[0.2,0.8]的线性范围内,线性相关系数|r|≥0.990。新疆自动化读数仪市场价
胶体金免疫层析技术:90年代初在金标渗滤技术的基础上建立起了一种简易快速的免疫学检测技术,即金标免疫层析技术。其技术原理是:将金标抗体固化在玻璃纤维或无纺布上,同时在硝酸纤维素膜上包被一条检测线及一条控制线,随后一同和样品垫、吸水垫及不干胶一起组合粘贴在塑料垫板上,再按一定规格切成检测条。检测时,样品首先吸附在样品垫,样品在水平流动过程中将固化金标抗体溶解,并随之通过硝酸纤维素膜向吸水滤纸端继续水平流动,吸水滤纸会帮助样品流动。若样品中存在被检测物质,测硝酸纤维素膜上包被的检测线和对照线会同时显色。否则,反应膜上只出现一条对照线。金标免疫层析技术快速、简便、稳定性好,有效期可长达2-3年。Beggs等于1990年将此技术用于HCG检测。随后由胶体金代替胶体硒用于乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)等检测,目前已多方面应用于病毒、细菌及各种蛋白质的检测,是目前临床检验应用次于ELISA的一种重要的检测试剂,但是检测时间却比酶免缩短近5倍,这促进了该方法的普及应用。 新疆自动化读数仪市场价
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