[VIP第1年] 指数:3
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内，从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积（~50fL），导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位，在第二步中，将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔（图1C）。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔，孔径为μm，孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下，用橡胶密封圈密封。Rissin等人，第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物（图1D）。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像，可以区分与单一酶分子相关的微球（“开启”孔）和不与酶相关的微球（“关闭”孔）；补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数（图1D）。使用SiMoA，浓度是因此，我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品，每个生物实验室都能用的单分子检测；创新性数字ELISA微量
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品；具有以下特点：多重、超敏微量、极速灵活、开放;
只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战：医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而，传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足，这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M（~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述，包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱，但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡，例如程序较长或无法提供定量答案。
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全自动加样与图像分析系统：智能化检测的关键环节，全自动加样仪与图像分析软件构成数字ELISA芯片的智能化**，实现从样本处理到结果输出的全流程自动化。加样仪的8通道设计确保精细定量加样，避免人工操作误差，加样精度达±1%；图像分析软件通过荧光信号识别与四参数Logistic曲线拟合，自动计算浓度值，相关系数r²≥0.999，结果可靠性高。在自动版芯片检测中，系统可实时监控磁珠捕获效率，自动剔除异常数据点，确保CV值<5%。该智能化体系不仅提升检测效率，更降低了对操作人员的技术依赖，适用于基层医疗单位与高通量检测场景，推动免疫检测从人工操作向自动化、标准化转型。
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从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM（2.5fg/mL），相当于全血中的~600aM（10fg/mL）；市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL）（补充图3）。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照：25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度，在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法，而无需复制目标
单分子阵列化结构使每个磁珠成为反应单元，放大信号，降低检测下限。
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它是一种DVD大小的圆盘，由24个阵列组成，每个阵列包含240微米大小的微孔，这些微孔呈径向排列，以便使用蓝光制造工艺和仪器内的液体处理并行处理。图2B显示了集成阵列及其相关流体通道的设计。每个阵列由216,000个40飞升大小的微孔组成，以六边形紧密排列模式排列在平面表面的3×4毫米区域内。每个微孔的标称尺寸为4.25µm直径、3.25µm深度和8µ米中心间距。流体通道深0.5毫米，通道和流体入口端口的总体积为74µLto，可容纳珠子和密封油溶液。通道中包含一个收缩部分以减少液体回流。微珠的分级是西莫亚技术的关键要求，微孔的几何形状足以容纳单个微珠（2.7µmdiameter；以下简称珠子）。西莫亚圆盘由环烯烃共聚物（COP）制造，因其具有高通量注塑成型的适应性，且成本低廉。具有良好的化学、生物和光学性能 数字 ELISA 芯片采用高透光基底与表面涂层，减少非特异性吸附，提升磁珠捕获效率。哪些是数字ELISA快速检测
自动版芯片操作简便稳定，2-4μl 微量样本可测多项指标，满足高通量检测需求。创新性数字ELISA微量
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数字化高敏ELISA芯片，低成本、便捷、快速进行微量样本的检测：1）微量样本即可检测；微量样本、微量试剂检测：流道高度只有几十微米，是原来微孔板高度的几十分之一，可有效节省样本量、试剂量；常规检测比较低只需要10ul样本即可进行完整检测。2）单个样本可以同时进行多指标的检测多重指标检测：单个样本，同时进行2-4个指标检测，可定制更多指标；芯片单孔同时检测2个指标芯片单孔同时检测4个指标3）灵活多通道检测：可以手动完成，主要在芯片上进行，对仪器不依赖（只需要移液枪和现成的荧光显微镜，即可实现检测），更小单元可做4-8个样本检测；初始的尝试成本极低（活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验）；相比普通ELISA试剂盒，更少96孔板价格2-4千元，每个检测孔20-40元；4）数字化的检测方式和检测结果；检测反应基底为阵列化、单分散排列的磁珠，可使用荧光显微镜进行可视化的免疫检测，原来的ELISA信号，转化成0或1，每个磁珠是否参与反应，反应效率如何。 创新性数字ELISA微量
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